高壓液相色譜柱主要由不銹鋼制成
現(xiàn)在流行兩種主要的高壓液相色譜柱的式樣,關(guān)鍵部件卡套有些不同。
一種式樣是螺母、卡套全套在柱管上,分配器和燒結(jié)過(guò)濾板按順序放在尾部接頭內(nèi)。擰緊螺母和尾部接頭,卡套一次成型緊緊咬住柱管外壁,起到很好的密封作用。分配器使得高壓流動(dòng)相不集中在一點(diǎn)沖擊柱床,又能把由流動(dòng)相帶來(lái)的樣品分散到柱頭上均勻分離,形成對(duì)稱(chēng)的色譜峰。燒結(jié)過(guò)濾板的孔徑<5微米,除了能緩和高壓流動(dòng)相對(duì)固定相的沖擊,也擋住了污染物進(jìn)入色譜柱柱頭。
高壓液相色譜柱怎樣過(guò)濾流動(dòng)相和樣品:
流動(dòng)相通常由水或緩沖溶液與有機(jī)溶劑混合而成,原則上,所有經(jīng)過(guò)高壓液相色譜柱的流動(dòng)相均應(yīng)過(guò)濾,但在實(shí)際操作上應(yīng)視具體情況而有所區(qū)別:當(dāng)有機(jī)溶劑用色譜純級(jí),水用石英亞沸水或其它超純水時(shí),在能確保水和有機(jī)溶劑的質(zhì)量且沒(méi)有受到污染時(shí),過(guò)濾并無(wú)更多實(shí)際意義。
當(dāng)流動(dòng)相中含有緩沖鹽時(shí),則過(guò)濾是必要的,如前所述,當(dāng)緩沖溶液放置一段時(shí)間(視環(huán)境溫度不同而異,夏季一般不超過(guò)48 h,冬季一般不超過(guò)一周)后,在使用前還應(yīng)重新過(guò)濾。
所配制的樣品試液在注入流路系統(tǒng)前均要經(jīng)0.45μm(0.22μm則更好)孔徑濾膜過(guò)濾。要注意區(qū)分水系和油系,二者不可混用,以防止濾膜溶解而造成污染。
裝流動(dòng)相的容器和色譜系統(tǒng)中的在線(xiàn)濾器要定期清洗和更換,以避免濾器因過(guò)載而起不到過(guò)濾作用。