C18液相色譜柱是一種的分析手段,液相色譜柱是色譜分析系統(tǒng)的“心臟”,由于被分析樣品種類(lèi)繁多,加之樣品基質(zhì)復(fù)雜,色譜柱極易被強(qiáng)保留物質(zhì)污染。這些強(qiáng)保留物質(zhì)通常難以洗脫,多次上樣后,聚集在柱頭端,堵塞篩板,甚至可能與填料發(fā)生相互作用導(dǎo)致填料變性,這會(huì)導(dǎo)致柱效下降,分離度降低和峰型異常等現(xiàn)象。因而液相色譜柱的維護(hù)是十分必要的。
C18液相色譜柱的維護(hù)詳解:
1.色譜柱的平衡
反相色譜柱由工廠(chǎng)測(cè)試后是保存在乙腈/水中的。新柱應(yīng)先使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈沖洗色譜柱。請(qǐng)一定確保您分析樣品所使用的流動(dòng)相和乙腈/水互溶。每天用足夠的時(shí)間以流動(dòng)相來(lái)平衡色譜柱,您就會(huì)在處理問(wèn)題方面獲得較大的"補(bǔ)償",而且色譜柱的壽命也會(huì)變得更長(zhǎng)!操作步驟:
a.平衡開(kāi)始時(shí)將流速緩慢地提高,用流動(dòng)相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線(xiàn)(緩沖鹽或離子對(duì)試劑流速如果較低,則需要較長(zhǎng)的時(shí)間來(lái)平衡)
b.如果使用的流動(dòng)相中含有緩沖鹽,應(yīng)注意用純水"過(guò)渡"即每天分析開(kāi)始前必須先用純水沖洗30分鐘以上再用緩沖鹽流動(dòng)相平衡;分析結(jié)束后必須先用純水沖洗30分鐘以上除去緩沖鹽之后再用甲醇沖洗30分鐘保護(hù)柱子。
2.色譜柱的再生
長(zhǎng)期使用的色譜柱,往往柱效會(huì)下降(柱子的理論塔板數(shù)減低)。可以對(duì)色譜柱進(jìn)行再生,在有條件的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)使用一個(gè)廉價(jià)的泵進(jìn)行柱子的再生。
C18液相色譜柱具有的性能。即使對(duì)于非常難分離的堿性化合物,也可獲得出色的峰形,從而改善了這些類(lèi)型的樣品的柱效和分離度。由于在硅膠制造和鍵合技術(shù)方面進(jìn)行了改進(jìn),因此能夠獲得這樣優(yōu)異的性能,并且這些技術(shù)*由安捷倫控制。